南方水产科学

作者：黄智康, 江世贵, 周发林, 黄建华, 杨其彬, 姜松, 李运东, 杨丽诗

关键词：斑节对虾, 性别鉴定, InDel标记, 实时荧光定量PCR, 熔解曲线, 发育早期

为分辨斑节对虾 (Penaeus monodon) 发育早期的性别，利用改良的插入/缺失 (InDel) 标记追踪了从受精卵、无节幼体、溞状幼体、糠虾幼体、仔虾后1 d (PL1)、仔虾后30 d (PL30)及亚成虾个体的性别，建立了测序和荧光定量PCR熔解曲线的检测方法。结果表明，InDel标记可扩增获得雌雄特异性序列，用测序法判定亚成虾性别的结果与外部观察结果一致，准确率达100%，对受精卵、无节幼体、溞状幼体及糠虾幼体均可得到雌雄特异性序列；进而建立了基于SYBR Green实时荧光定量PCR (Quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR) 熔解曲线的快速鉴定斑节对虾性别的方法，其中雄性特异序列的熔解温度 (Melting temperature, Tm)为 (79.10±0.10) ℃，雌性为 (78.45±0.20) ℃，通过特异的熔解曲线可准确区分PL30、亚成虾和无节幼体Ⅵ期个体，准确率可达96.3%以上。

来源：2020年第3期

《南方水产科学》期刊编辑部

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