南方水产科学杂志

南方水产科学杂志2023年第6期

• 珠江典型河段浮游植物群落结构特征及其对水质的指示作用

  陈亮东, 詹建坡, 王庆

  浮游植物为河流生态系统的初级生产者，其动态变化关系到渔业资源和水生态系统的稳定。分别于2021年枯水期 (3月)、丰水期 (7月) 和平水期 (11月) 对珠江3个典型河段开展浮游植物群落结构调查，利用生物多样性等指标评价水质现状，为珠江水污染防治和水生态恢复提供技术支撑。结果显示，浮游植物种类、密度、生物量和优势种呈现显著的时空变化 (P<0.05)。全年共鉴定出浮游植物187种，3、7和11月分别鉴定出117、98和77种，平均密度分别为8.6×105、7.2×106和4.0×105 个·L−1，生物量分别为1.235 4、4.674 5和0.569 8 mg·L−1，其中丰水期北江流溪河石角段蓝藻密度高达1.18×107 个·L−1 (达到轻微蓝藻水华水平)。上游北江流溪河河段浮游植物群落结构由枯水期的绿藻型演变为丰水期的绿藻-蓝藻型，全年以四尾栅藻 (Scenedesmus quadricauda)、细小平裂藻 (Merismopedia tenuissima) 和被甲栅藻博格变种双尾变型 (S. armatus var. boglariensis f. bicaudatus) 为优势种，下游珠江河口莲花山到大虎岛段呈硅藻型到硅藻-蓝藻型的演变，以颗粒直链藻 (Melosira granulata) 和细小平裂藻为优势种。Shannon多样性指数 (H')、Pielou 均匀度指数 (J') 和Margalef 丰富度指数 (D) 分别介于1.58~3.05、0.51~0.84和1.60~3.42。基于生物多样性指数综合评价显示，被调查的珠江3个典型河段水质介于轻度污染到α-中污染之间，水质仍需治理改善。

• 环境因子对3种不同作业类型鲣CPUE的影响研究

  马有成, 朱国平, 张健, 王啸, 张鸿霖, 石建高

  鲣(Katsuwonus pelamis)广泛分布于各大洋热带和亚热带海域，在世界金枪鱼渔业中占有重要地位，其资源丰度受多种海洋环境因子的影响。为探明降水对不同鲣群体资源分布及变动的影响机制，利用2017—2019年毛里塔尼亚海域双拖渔业数据、2018—2020年中西太平洋围网渔业数据和2010—2020年美洲热带金枪鱼委员会网站记录的延绳钓渔业数据，结合降水、海表面盐度 (Sea surface salinity, SSS) 和海表面温度 (Sea surface temperature, SST) 等环境数据，通过广义加性模型(Generalized additive model, GAM)分析鲣的3种不同作业方式的单位捕捞努力量渔获量(Catch per unit effort, CPUE)时空分布及其与降水等环境因子之间的关系。结果表明：月份对双拖和延绳钓作业方式鲣CPUE的影响显著(P<0.05)；纬度对3种鲣作业方式的CPUE均存在显著性影响(P<0.05)；降水对双拖和围网作业方式鲣CPUE分别存在极其显著性(P<0.001)和显著性(P<0.05) 影响，且影响趋势较为一致，即这2种作业方式中高CPUE出现在较为适宜的降水范围内，然而降水对鲣的延绳钓CPUE的影响并不显著；SSS和SST对鲣的3种作业方式CPUE影响显著(P<0.05)。因此，在今后分析环境因子对渔业CPUE的影响效果时，建议将降水放入常规海洋环境因子中。

• 基于耳石地标点法的南黄海和东海小黄鱼种群关系研究

  梁龙, 宋大德, 康中杰, 张琥顺, 李国东, 吴晓睿, 李冬佳, 王淑艳, 闫欣, 祝斐, 熊瑛

  为比较不同地理群体的小黄鱼 (Larimichthys polyactis) 矢耳石形态特征，进一步明晰其种群划分问题，首次应用长于提取形态特征的地标点法探究了南黄海和东海小黄鱼群体的耳石形态学差异。2022年3—12月，于海州湾、吕泗、长江口和舟山渔场各采集30尾1龄小黄鱼，统一摘取其左矢耳石样本，在耳石外轮廓和耳石内听沟上分别提取了7和4个地标点，进行地标点法分析。结果显示：1) 耳石听沟上的地标点8—11相对扭曲贡献率总计为91.88%，耳石外轮廓上的地标点1—7的总贡献率为8.12%，表明4个地理群体小黄鱼的耳石形态差异主要来源于耳石听沟；2) 主成分分析散点图显示，部分海州湾群体明显可划分为1个类群，剩余海州湾群体和其他3个渔场所有群体高度重叠聚集为另一个类群，表明南黄海海域可能存在两个小黄鱼种群，即南黄海-东海群和北黄海-渤海群，同时也表明海州湾渔场存在着小黄鱼混栖群体。该现象可能是由于小黄鱼早期鱼卵、仔幼鱼阶段被动扩散和后期主动洄游造成的生境差异，从而诱导其耳石形态表型性状不同。研究结果证实了耳石地标点法在鱼类种间识别的可行性，从耳石形态学角度为中国近海小黄鱼的种群划分提供参考。

• 超高分子量聚乙烯和铜合金网衣的污损生物附着特征研究

  范晓旭, 林燊, 刘旦, 田伟, 蒋玫, 李磊

  为研究不同材质网衣的污损生物附着效果，于2022年3—5月 (春季) 和6—8月 (夏季) 在福建莆田南日岛海域开展超高分子量聚乙烯网衣和铜合金网衣的现场挂网实验。结果表明：两种网衣污损生物的附着呈现出一定的季节性差异，两种网衣污损生物的密实度、种类数量、优势种种类数、湿质量和密度均表现为春季低于夏季。其中，超高分子量聚乙烯网衣春、夏季的密实度平均值分别为47.19%、86.98%，污损生物的湿质量平均值分别为 (144.83±15.69)、(1 054.59±34.81) g·网−1，密度平均值分别为 (2 699±49)、(4 630±53) 个·网−1，种类数分别为12、35种，优势种种类数分别为4、6种；铜合金网衣春、夏季的密实度平均值分别为41.04%、74.95%，污损生物的湿质量平均值分别为 (118.32±20.13)、(876.25±23.16) g·网−1，密度平均值分别为 (2 678±42)、(3 870±64) 个·网−1，种类数分别为12、19种，优势种种类数分别为3、4种。春、夏季高分子量聚乙烯网衣污损生物的密实度、种类数 (春季相同)、优势种种类数 (春季相同)、湿质量和密度平均值均高于铜合金网衣。海水温度的变化是污损生物季节性差异的主要原因，铜合金网衣的防污损生物附着效果优于高分子量聚乙烯网衣。

• 钝缀锦蛤在北海、防城港、钦州海区的中培与养成实验

  杨凌, 刘一鸣, 徐炳杰, 王超奇, 吴韬, 邢清淦, 裴琨, 韦朝民, 曾尚伟, 潘英

  为探究钝缀锦蛤 (Tapes dorsatus) 在广西北部湾海域的适宜养殖密度和高效养殖模式，2021年5月—2023年1月在北海、防城港、钦州海区滩涂进行筐式中培、筐式养成和网笼吊养实验。结果显示：1) 钝缀锦蛤在北海、防城港、钦州海区的适宜中培密度分别为2 000、1 500、1 500 粒·筐−1，随着中培密度的增加，其生长指标和成活率均呈下降趋势；北海海区各密度组的成活率均优于防城港和钦州海区且差异显著 (P<0.05)，除d5组 (3 000 粒·筐−1) 的生长指标 (壳长、壳宽及体质量) 小于防城港和钦州海区外，其他组生长指标均大于防城港和钦州海区。2) 养成期钝缀锦蛤在北海、防城港、钦州海区适宜养殖密度分别为40、40、20 粒·筐−1，各生长指标与成活率均为北海>防城港>钦州，且成活率随养成密度的增加呈下降趋势。防城港海区的网笼吊养密度为30 粒·笼−1时的各生长指标均为最大，50 粒·笼−1时的成活率最高；网笼吊养模式下，各个密度组的生长指标和成活率均无显著性差异 (P>0.05)。海区环境因子调查结果显示：北海海区的年平均水温、滩温、盐度、透明度、pH、溶解氧 (DO) 略高于防城港和钦州海区，水质较为稳定，钦州、防城港海区的水质环境变化较大且较不稳定；北海滩涂底质粒径以粗砂为主 (49.00%)，防城港以中砂为主 (59.28%)，钦州以细砂为主 (77.33%)。海区浮游植物调查显示，浮游植物藻属种类和数量以北海最多，防城港次之，钦州最少。研究表明，钝缀锦蛤适宜在北海、防城港、钦州3个海区进行筐式中培和养成，北海的养殖效果优于防城港和钦州，且1.5 龄贝适宜在防城港海区进行网笼吊养。

• 春砂仁精油对尼罗罗非鱼幼鱼生长、消化、抗氧化能力和血清生化指标的影响

  李成辉, 董宏标, 郑晓婷, 桂福坤, 曾祥兵, 明俊超, 陈飞, 陈健, 张家松

  为评估春砂仁 (Amomum villosum) 精油在尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) 养殖中促消化和保护肠道等功效，在饲料中添加不同剂量 0 (对照组)、2 (低剂量组)、4 (中剂量组) 和8 (高剂量组) g·kg−1 的春砂仁精油饲养罗非鱼幼鱼 (20.34±2.08) g 连续8周。结果显示，随着精油添加剂量的增加，1) 各实验组终末体质量、终末体长、体质量增长率和特定生长率呈先升后降的趋势，饵料系数呈先降后升的趋势，其中低剂量组的各项生长指标均优于其他组 (P<0.05)。2) 各实验组胃蛋白酶 (Pep)、胃淀粉酶 (G-AMS)、肠淀粉酶 (I-AMS) 和肠脂肪酶 (LPS) 活性呈先升后降的趋势，低剂量组的各项消化酶活性均显著高于其他组 (P<0.05)。3) 各实验组罗非鱼幼鱼肠道中总抗氧化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 活性、谷胱甘肽 (GSH) 和丙二醛 (MDA) 浓度均呈先升后降的趋势，低剂量组升高显著 (P<0.05)。4) 各实验组罗非鱼幼鱼血清中总蛋白 (TP)、球蛋白 (GLOB)、总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-CH)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-CH) 浓度，碱性磷酸酶 (ALP) 和丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 活性均呈先降后升的趋势，其中低剂量组TP、GLOB、TC、LDL-CH和HDL-CH显著低于其他组 (P<0.05)。综上，在该实验条件下拌喂2 g·kg−1春砂仁精油能够显著增强罗非鱼幼鱼的消化和肠道抗氧化能力，提高脂质代谢水平，改善血清肝功能指标，进而提高其生长性能。

• 大鳍鳠胚胎及仔稚鱼发育观察

  陈思奇, 朱永久, 吴兴兵, 杨德国, 李晓莉

  大鳍鳠 (Mystus macropterus) 是一种亟待开发的优质养殖品种。探明养殖大鳍鳠早期发育阶段的特征和规律，可为其人工催产和苗种培育提供理论依据。采用显微镜观察法，对其胚胎及仔稚鱼发育各时期的形态特征和发育特点进行了研究，并对其形态学指标进行了测量，推算出仔稚鱼阶段生长特性的回归方程。结果表明：大鳍鳠受精卵呈椭圆形、黄褐色，卵径为 (3.46±0.3) mm；平均水温26.2 ℃下，大鳍鳠胚胎发育历时79 h，积温为2065.26 h·℃，根据发育时胚胎的典型外部形态特征，将其分为受精卵、胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官分化期和出膜期共8个阶段28个时期；初孵仔鱼全长 (7.31±0.52) mm，仔鱼期历时10 d，仔鱼前期卵黄囊大部分被吸收，全长特定生长率 (SGRL) 为9.79%，体质量特定生长率 (SGRm) 为12.31%，出膜后7~8 d仔鱼大部分开口，9 d卵黄囊消失，仔鱼后期SGRL为4.15%，SGRm为12.25%。稚鱼期历时11 d，各鳍基本长成，体型和体色接近成鱼，SGRL为4.30%，SGRm为13.17%，全长22~24 mm。统计模型显示，大鳍鳠仔稚鱼的生长属于异速生长类型。

• 长江鲟幼鱼黏液、肠道内容物及其养殖水体的微生物菌群结构和潜在病原菌分析

  田甜, 张建明, 朱欣, 张德志, 舒婷婷

  长江鲟 (Acipenser dabryanus) 为中国特有鱼类，已被国际自然保护联盟 (IUCN) 列为极危级 (CR) 物种。通过Illumina高通量测序技术，探究了长江鲟幼鱼黏液、肠道内容物及其养殖水体的微生物菌群组成、多样性及动态变化，以期为长江鲟幼鱼健康养殖和病害分析提供参考依据。结果显示：养殖水体微生物多样性最高，黏液次之，肠道内容物最低。黏液和肠道内容物微生物菌群结构更为相似，且可与养殖水体微生物菌群区分开来。在门水平，黏液和肠道内容物均以放线菌门、变形菌门和厚壁菌门为主；养殖水体则以变形菌门、拟杆菌门和厚壁菌门为主。研究还发现7种可能的病原菌在养殖水体和黏液中富集，当鱼体处于应激状态或养殖环境恶化时，可能导致病害发生。BugBase表型预测分析发现，长江鲟幼鱼黏液、肠道内容物及其养殖水体中存在革兰氏阴性菌和阳性菌。其中肠道内容物的优势菌群为革兰氏阳性菌，占比超过60%；黏液和养殖水体的优势菌群均为革兰氏阴性菌，占比分别为60%和70%。在氧气需求方面，黏液和肠道内容物以好氧菌为主，养殖水体以好氧菌和兼性厌氧菌为主。

• 玉足海参变态附着阶段转录组分析

  吴晓鹏, 黄敏伟, 陈晓瑛, 彭凯, 赵吉臣, 钟平, 刘凤坤, 张业辉, 黄文

  海参幼苗发育需要经历耳状幼体、樽形幼体、五触手幼体及幼苗阶段，而从浮游幼体变态发育至附着幼苗阶段的高死亡率是热带海参繁育中的共性问题，目前有关热带海参变态发育的调控机制仍不清楚。以玉足海参 (Holothuria leucospilota) 为研究对象，采集小耳幼体 (A)、中耳幼体 (B)、大耳幼体 (C) 和樽形幼体 (D) 4个时期样品进行高通量转录组测序分析，以探究其变态发育的分子机制。结果显示，共产生83.6 GB Raw reads，拼接获得93 528个Unigenes。对4个组测序文库的相邻组间 (A_vs_B, B_vs_C, C_vs_D) 进行两两比较，A_vs_B、B_vs_C和C_vs_D的差异表达基因数目分别为17 732、11 757和11 319 个。GO功能富集显示，差异基因主要富集于分子功能、催化活性等与细胞成长相关的GO功能。此外对KEGG通路进行了分析，结果显示差异基因显著富集于PI3K-Akt、细胞周期、癌症途径等与细胞分化增殖、凋亡相关的信号通路中，其中在幼体由浮游的大耳状幼体变态至附着的樽形幼体过程中，癌症途径的富集频率显著上升，表明其在幼体生长发育模式转换上发挥了关键作用。筛选的差异表达基因及预测的功能信息可为热带海参生长发育调控机制研究、人工繁育及分子改良应用提供参考。

• 基于微卫星多重PCR的黄鳝亲子鉴定技术

  鲁弘毅, 田海峰, 胡乔木, 李忠

  为助力黄鳝 (Monopterus albus) 良种选育中的亲子鉴定和系谱管理问题，利用黄鳝全基因组预测并筛选获得的16个多态性较高的微卫星标记，建立了2组微卫星多重PCR体系，并成功用于11个家系的亲子鉴定。通过Cervus 3.0软件对132尾黄鳝进行遗传多样性分析，结果显示，16个微卫星标记的平均等位基因数 (Na) 为5.562，平均观测杂合度 (Ho) 和平均期望杂合度 (He) 分别为0.627和0.619，平均多态信息含量 (PIC) 为0.564。亲子鉴定结果表明，双亲基因型未知时单亲本的累积排除概率 (CE-1P) 为0.999 999 99，单亲基因型已知时另一亲本的累积排除概率 (CE-2P) 为0.999 999 91，双亲基因型未知时双亲的累积排除概率 (CE-PP) 为0.999 964 76。黄鳝11个家系的模拟鉴定率为99.96%，实际鉴定率为95%。模拟分析不同亲本数的结果显示，实验的16个微卫星标记在双亲性别已知的200对亲本和双亲性别未知的150对亲本的情况下，均可达到95%以上的鉴定率。利用NTSYS软件对11个家系的110尾子代个体进行聚类分析，结果显示除2尾子代外其余108尾子代均可正确聚类，准确率为98.18%。实验构建的2组微卫星多重PCR亲子鉴定技术为黄鳝良种选育及种质资源管理提供了重要技术支持。

• 一株耐高氨氮好氧反硝化细菌的鉴定及脱氮性能研究

  冯雨薇, 苏新国, 孙慧明, 林浩澎, 陈琼华, 舒琥

  氨氮 (NH4 +-N)、硝态氮 (NO3 −-N)、亚硝态氮 (NO2 −-N) 等含氮 (N) 化合物是工厂化养殖系统中的主要污染物，水中N浓度较高易造成养殖水体污染并危害水生动物的安全，而好氧反硝化细菌被广泛用于养殖尾水的N降解。为获得一株能安全高效处理高NH4 +-N废水的菌株，对从养殖池塘筛得的耐高NH4 +-N好氧反硝化细菌WM28进行了研究。运用形态学观察、生理生化及16S rRNA基因测序对该菌株进行种属鉴定；采用抗生素实验、斑马鱼(Danio rerio) 攻毒实验对菌株进行了环境及生物安全性评估；在3种单一氮源模拟废水下测定其生长与脱氮性能，并在高浓度NH4 +-N模拟废水中对其进行脱氮能力测试。经鉴定，WM28为红球菌属赤红球菌 (Rhodococcus ruber)；有较高的抗生素敏感性及较好的生物安全性。在单一NH4 +-N、NO3 −-N、NO2 −-N模拟废水中，培养48 h后N去除率分别为100%、76.3%、66.99%；高浓度NH4 +-N模拟废水结果显示：100~500 mg·L−1高浓度NH4 +-N模拟废水在48 h后的NH4 +-N去除率为100%；700 mg·L−1 NH4 +-N在116 h后的去除率在88%以上；在第120小时，NH4 +-N初始质量浓度为1 000 mg·L−1时仍有脱氮能力，去除率为74.38%，说明菌株WM28具有较好的高NH4 +-N耐受性。综上所述，菌株WM28是一株耐NH4 +-N、安全且高效的好氧反硝化菌，在处理养殖尾水、工业废水上有较好的应用前景。

• 硫酸铜、敌百虫、聚维酮碘对吉富罗非鱼的急性毒性及组织病理学研究

  戴瑜来, 王宇希, 许宝青, 戴杨鑫, 林启存, 蔡丽娟

  为评估水产养殖中常用药物——硫酸铜、敌百虫、聚维酮碘的合理给药量及其安全性，以及对吉富罗非鱼 (Oreochromis niloticus) 的毒害作用，采用静态急性毒性试验法，研究了这3种药物对吉富罗非鱼鱼苗的急性毒性及组织病理影响。结果表明，硫酸铜对吉富罗非鱼24、48和96 h的半致死浓度 (LC50) 分别为13.715、10.351和5.896 mg∙L−1，安全浓度 (SC) 为1.769 mg∙L−1；敌百虫对吉富罗非鱼24、48和96 h的LC50分别为43.036、25.887 和16.689 mg∙L−1，SC为2.810 mg∙L−1；聚维酮碘对吉富罗非鱼24、48和96 h的LC50分别为10.509、9.301和8.674 mg∙L−1，SC为2.190 mg∙L−1。组织病理学研究结果显示，硫酸铜暴露可造成鳃丝轮廓模糊不清、鳃组织空泡化，肝组织空隙变大、空泡化、细胞核萎缩，脑组织神经纤维出现破损、细胞凋亡，肾小管结构破坏、核膜破损；敌百虫暴露可造成鳃组织破坏、细胞凋亡，肝组织无核化、线粒体肿胀及空泡化，脑组织神经纤维破损、核固缩，肾间质出血；聚维酮碘暴露可造成鳃丝萎缩、线粒体双层膜结构不完整，肝组织空泡化、细胞出现凋亡，神经纤维轻微破损。研究表明，硫酸铜、敌百虫、聚维酮碘对于该研究规格的吉富罗非鱼是较为安全的药物，但需谨慎控制使用剂量，以免造成不可逆的组织损伤。

• 温度、光照强度和盐度对冬青叶马尾藻生长和光合生理的影响

  徐孟杰, 李青楠, 姚丹丹, 邹潇潇, 黄惠琴, 鲍时翔, 宫春光, 朱军, 穆丹

  冬青叶马尾藻 (Sargassum ilicifolium) 是海南岛近岸海藻场的重要建群种。利用叶绿素荧光技术，结合藻体光合色素含量和生长率变化，研究了冬青叶马尾藻的生理生态学适应性，为海藻场的保护和恢复提供技术支撑。在不同温度 (10、14、18、22、26和30 ℃) 、光照强度 (10、20、40、80、120、140和200 µmol·m−2·s −1) 和盐度 (16‰、20‰、24‰、28‰、32‰、36‰ 和40‰) 条件下，测定冬青叶马尾藻的特定生长率、叶绿素含量和最大光量子产量 (Fv/Fm) 等参数。结果显示，冬青叶马尾藻生长的适宜温度为18~26 ℃，适宜光照强度为20~120 µmol·m−2·s −1，适宜盐度为16‰~36‰。研究发现，冬青叶马尾藻是喜温的大型海藻，其对低温胁迫更为敏感，过低或过高的光照强度会导致藻体损伤。因此，在对以冬青叶马尾藻为主的海藻场进行保育和恢复的过程中，应充分考虑温度、光照强度对其生长和空间分布的影响。

• 高浓度臭氧冰的制备及贮藏条件探究

  黄安妮, 马海霞, 邓建朝, 胡晓, 戚勃, 杨贤庆

  臭氧冰相比于臭氧气体和臭氧水，不仅保持了臭氧原有的特性，还具有稳定性更高、保鲜效果更好、使用更方便等优势。为探究制备高浓度的臭氧冰和提高臭氧保存率的方法，实验先采用臭氧水一体机循环装置制备高浓度臭氧水，通过研究臭氧水一体机中臭氧气体流量的设定和循环水箱中水温及pH的调节，确定制备高浓度臭氧水的最适条件，再利用高浓度臭氧水制备臭氧冰，通过改变臭氧冰的制备条件和贮藏方式。结果表明：固定臭氧气体流量为3 L·min−1，调节循环水箱中水温为5 ℃、pH为3，可以在短时间内制备出质量浓度为50.27 mg·L−1的臭氧水；采用液氮冻结水温为5 ℃、pH为5的高浓度臭氧水，可以制备出臭氧保存率达58.13%的臭氧冰；加入乙酸作为臭氧冰的酸度调节剂，于−40 ℃低温环境中贮藏，可有效提高冰中臭氧的稳定性。

• pH和菲协同效应对中华绒螯蟹幼蟹的毒性效应

  杨志刚, 江青青, 房余程, 陈阿琴, 成永旭, 王爱民

  为探究酸化以及环境污染物菲 (Phenanthrene, PHE) 协同效应对中华绒螯蟹 (Eriocheir sinensis) 的影响，开展了不同pH (5.5、6.5、7.8) 和PHE质量浓度 (0、50 µg·L−1) 对中华绒螯蟹 (15.0±2.3) g 的联合暴露实验 (为期14 d)。结果发现：1) 中华绒螯蟹在pH 5.5×PHE 50的协同处理下，肝胰腺和鳃组织出现严重病理损伤，肝胰腺小管形状改变，肝管细胞萎缩出现大量空泡，鳃轴肿大，鳃丝角质层表皮破损，局部基膜破裂；而pH 6.5×PHE 50对中华绒螯蟹肝胰腺和鳃组织的损伤并不显著。2) PHE处理引起中华绒螯蟹幼蟹肝胰腺糖原 (Gly) 以及低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 浓度显著降低，表明PHE会导致中华绒螯蟹能量代谢水平下降；相较于对照组，pH 5.5×PHE 50对甘油三酯 (TG)、Gly、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) 和LDL-C浓度均有抑制效果，而pH 6.5×PHE 50使得中华绒螯蟹TG浓度较对照组显著升高。3) 实时荧光定量PCR结果表明，多环芳烃受体 (ahr)、芳香烃受体核转位因子 (arnt) 和细胞色素p450 1A1(cyp1a1) 基因的表达量均随pH的降低而升高，并在pH 5.5时达到最高。以上结果表明，酸化和PHE的联合作用改变了中华绒螯蟹的能量代谢，其中pH 5.5时显著加剧了PHE对其肝胰腺组织结构的毒性作用以及对能量代谢的影响。

• 牡蛎诺如病毒受体类Lewis抗原合成相关基因CgFUT5的克隆与表达鉴定

  桂彬彬, 曲梦, 张蔚然, 李明玉, 江艳华, 姚琳, 王联珠

  Lewis抗原被认为是诺如病毒特异性结合受体，作为诺如病毒传播载体，牡蛎中也存在着类Lewis抗原，但牡蛎合成这种碳水化合物的途径尚未阐明。为解析牡蛎中诺如病毒受体类Lewis抗原的合成路径，利用cDNA末端快速扩增 (Rapid amplification of cDNA ends, RACE) 技术克隆得到太平洋牡蛎 (Crassostrea gigas) 的CgFUT5基因全序列并进行生物信息学分析，通过实时荧光定量聚合酶链式反应 (RT-qPCR) 分析其在5种组织中的表达情况。构建原核表达质粒转化大肠杆菌 (Escherichia coli) 实现异源表达，并通过免疫印迹法 (Western blot) 鉴定免疫原性。克隆得到了具有1 173 bp开放阅读区的CgFUT5基因cDNA序列，系统发育树显示CgFUT5基因与多个物种具有合成Lewis抗原功能的岩藻糖基转移酶基因遗传学关系较近。重组CgFUT5蛋白可在大肠杆菌中过量表达，且表达的重组CgFUT5蛋白与抗人FUT5抗体及抗6×His标签抗体均能特异性结合。研究发现CgFUT5基因在牡蛎鳃组织中大量表达，CgFUT5蛋白与人FUT5蛋白具有相似的免疫原性，推测牡蛎中存在着类Lewis抗原的合成通路，并且调控牡蛎类Lewis抗原合成的基因还具有组织表达差异性。

• 牛蛙胚胎发育的形态特征观察

  陈秋羽, 郑晓婷, 仲劲松, 陈智兵, 王莹, 梁雪莹, 董宏标, 张家松

  为探究牛蛙 (Rana catesbeiana) 早期胚胎发育过程并补充其生物学及影像学资料，采用人工养殖的牛蛙作为亲本，自然抱对产卵受精，观察记录其受精卵的胚胎发育过程，并根据胚胎形态的变化和生理特征划分胚胎发育分期表。结果显示，牛蛙受精卵卵径为 (1.41±0.31) mm，吸水后膨胀沉底，且能自转为植物极朝下、动物极朝上的状态。在温度为 (24.5±0.4) ℃的条件下，牛蛙早期胚胎发育过程可划分为7个阶段24个时期，自受精卵发育至鳃盖闭合期共耗时177 h 38 min，总积温为4 249.71 h·℃，整个发育过程呈现前期发育速度较快、后期较慢的趋势。胚胎自肌肉效应期开始，在受到外界刺激时，会做出头尾弯曲的环形收缩反应；而后随着胚胎孵化至鳃盖闭合完成期，胚体即可在水中自由游动。

• 中华鳖Dkkl1基因的分子特征及对外源性激素处理的响应

  汪泳昌, 祝骏贤, 李建松, 陈辰, 纪利芹, 洪孝友, 刘晓莉, 王亚坤, 吴聪聪, 余汶君, 罗来福, 陈海港, 魏成清, 朱新平, 张俊杰, 李伟

  Dkkl1基因在哺乳动物睾丸发育和精子发生过程中扮演着重要角色，然而其在龟鳖类动物中的研究十分有限。为探索龟鳖类Dkkl1基因的潜在功能和作用机制，克隆了中华鳖 (Pelodiscus sinensis) Dkkl1基因的cDNA片段，分析其序列特征、表达模式以及对外源性激素处理的响应。克隆获得的Dkkl1基因cDNA序列长度为823 bp，其中3'-非编码区(UTR)为67 bp，5' UTR为90 bp，开放阅读框为666 bp，共编码222个氨基酸。中华鳖Dkkl1蛋白是一种稳定性较差、亲水性较强的碱性蛋白，其二级结构和三级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。氨基酸序列同源性比对结果显示其与中华草龟 (Chinemys reevesii) Dkkl1蛋白的相似性较高 (81%)，与棱皮龟 (Dermochelys coriacea) Dkkl1蛋白的同源性较低 (70%)。通过RT-PCR和RT-qPCR分析发现，中华鳖Dkkl1 mRNA在 3 冬龄成体精巢中极显著性高表达 (P<0.001)，而在其余体组织中几乎不表达。并且随着年龄的增长，中华鳖精巢中Dkkl1基因的表达量逐渐上升，并在3冬龄时达到顶峰。此外，17β-雌二醇 (E2) 和17α-甲基睾酮 (17α-MT) 处理均可显著抑制成体中华鳖精巢中Dkkl1基因的表达 (P<0.05)。研究表明，Dkkl1基因可能在中华鳖睾丸发育和精子发生过程中起着重要作用。