南方水产科学

作者：闫娇, 高坤鹏, 余可欣, 孙建安, 毛相朝

关键词：脂肪酶, 雨生红球藻, 异源表达, 酶学性质, 虾青素酯水解

虾青素具有多种生理活性，但在自然界中通常以不同脂肪酸结合的虾青素酯形式存在，将虾青素酯水解为游离虾青素是提高其吸收利用度和制备特定构型虾青素酯的重要研究方向。以浅紫色链霉菌 (Streptomyces violascens ATCC 27968) 来源的脂肪酶Sv-lip5为研究对象，将其在枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 中进行异源表达，分析其酶学性质并探究其在虾青素酯水解中的应用。结果显示，Sv-lip5的最适温度为45 ℃，最适pH为10.0 (Gly-NaOH缓冲液)，在35~55 ℃条件下孵育21 h后仍有高于55.7%的酶活。Sv-lip5为耐碱性酶，在碱性条件下孵育48 h后相对酶活仍可保持在70%以上。Sv-lip5可有效水解雨生红球藻 (Haematococcus pluvialis) 油中的虾青素酯，以对硝基苯酚棕榈酸酯作为底物测定该酶的比活力为12.46 U·g−1，水解虾青素酯的最佳反应条件为pH 8.0，乙醇与缓冲液体积比为1∶12，最佳加酶量和时间分别为900 mg和12 h。在5.5 mL反应体系中添加900 mg的酶粉后，1 h有明显水解效果，第12小时可达最高水解率 (98.27%)，200 μg虾青素酯中游离虾青素产量为147.48 μg，实现了游离虾青素的高效生物水解制备。

来源：2022年第2期

《南方水产科学》期刊编辑部

查看南方水产科学杂志2022年第2期