南方水产科学

作者：尤钰娴, 解文嫣, 班宵逢, 孔昊存, 李才明, 李兆丰

关键词：琼胶酶, 淡黄色噬琼胶菌, 生物信息学分析, 异源表达, 高效制备

为丰富优质琼胶酶品类，充分利用海藻资源，实现功能性琼胶寡糖的高效制备，采用基因组挖矿技术挖掘得到一个来源于海洋细菌——淡黄色噬琼胶菌 (Agarivorans gilvus) WH0801的β-琼胶酶 (β-AGA酶)，利用生物信息学分析对该酶的理化性质和结构特征进行预测，发现该酶为非分泌性蛋白。在此基础上，采用分子生物学手段引入信号肽，实现了该酶在大肠杆菌 (Escherichia coli) 中的胞外表达，并通过发酵调控策略优化提高其生产效率。结果表明，采用种龄5 h的种子培养液进行发酵，发酵出发培养基为TB (pH 7.0)，碳源为6 g·L−1的果糖，氮源为30 g·L−1的酵母提取液Ⅱ，于25 ℃培养2 h后加入终浓度为0.025 mmol·L−1的IPTG诱导48 h，此条件下发酵所得酶活为16.72 U·mL−1，相比初始酶活提高了约5倍，证明β-AGA酶具有良好的工业应用潜力。

来源：2022年第2期

《南方水产科学》期刊编辑部

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