南方水产科学

作者：王逗, 游锦若, 申铉日, 李永成, 夏光华, 何燕富, 张雪莹

关键词：橙黄小单孢菌, 几丁质酶, 克隆表达, 酶学性质, N, N-二乙酰基壳二糖

从海洋微生物橙黄小单孢菌 (Micromonosprra aurantiaca) 的基因组DNA中克隆到一条新型的碳水化合物18家族几丁质酶基因Machi3，并成功在大肠杆菌 (Escherichia coli) 中表达。该酶的最适反应温度和pH分别为55  ℃和7.0，在低于55  ℃和pH 6.0~9.0范围内稳定性较好。镁离子 (Mg2+)、钙离子 (Ca2+)、吐温40 (Tween 40) 和吐温80 (Tween 80) 对MaChi3的酶活力有轻微的促进作用。该重组酶对α-几丁质、胶体几丁质、虾壳粉、不同脱乙酰度 (50%~95%) 的壳聚糖、淀粉及纤维素均具有水解活性，其中以胶体几丁质为底物时酶活力最高 (2.24 U·mg−1)。由扫描电镜结果可知，几丁质经盐酸 (HCl) 预处理后得到的胶体几丁质纤维结构变得松散，更有利于MaChi3的水解作用。以胶体几丁质为底物时动力学参数Km和Vmax值分别为5.93 mg·mL−1和8.58 μmol·(min·mg)−1。此外，胶体几丁质经MaChi3酶解后生成的主产物为N, N-二乙酰基壳二糖，产率 (几丁质) 为285.54 mg·g−1。该酶展现出良好的酶学特性，为其在几丁质资源中的开发和应用奠定了基础。

来源：2023年第5期

《南方水产科学》期刊编辑部

查看南方水产科学杂志2023年第5期