南方水产科学

作者：汪泳昌, 祝骏贤, 李建松, 陈辰, 纪利芹, 洪孝友, 刘晓莉, 王亚坤, 吴聪聪, 余汶君, 罗来福, 陈海港, 魏成清, 朱新平, 张俊杰, 李伟

关键词：中华鳖, <i>Dkkl1</i>基因, 睾丸发育, 精子发生, 生物信息学分析, 外源性激素

Dkkl1基因在哺乳动物睾丸发育和精子发生过程中扮演着重要角色，然而其在龟鳖类动物中的研究十分有限。为探索龟鳖类Dkkl1基因的潜在功能和作用机制，克隆了中华鳖 (Pelodiscus sinensis) Dkkl1基因的cDNA片段，分析其序列特征、表达模式以及对外源性激素处理的响应。克隆获得的Dkkl1基因cDNA序列长度为823 bp，其中3'-非编码区(UTR)为67 bp，5' UTR为90 bp，开放阅读框为666 bp，共编码222个氨基酸。中华鳖Dkkl1蛋白是一种稳定性较差、亲水性较强的碱性蛋白，其二级结构和三级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。氨基酸序列同源性比对结果显示其与中华草龟 (Chinemys reevesii) Dkkl1蛋白的相似性较高 (81%)，与棱皮龟 (Dermochelys coriacea) Dkkl1蛋白的同源性较低 (70%)。通过RT-PCR和RT-qPCR分析发现，中华鳖Dkkl1 mRNA在 3 冬龄成体精巢中极显著性高表达 (P&lt;0.001)，而在其余体组织中几乎不表达。并且随着年龄的增长，中华鳖精巢中Dkkl1基因的表达量逐渐上升，并在3冬龄时达到顶峰。此外，17β-雌二醇 (E2) 和17α-甲基睾酮 (17α-MT) 处理均可显著抑制成体中华鳖精巢中Dkkl1基因的表达 (P&lt;0.05)。研究表明，Dkkl1基因可能在中华鳖睾丸发育和精子发生过程中起着重要作用。

来源：2023年第6期

《南方水产科学》期刊编辑部

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