南方水产科学

作者：李硕, 陈静妮, 赵立宁, 黄春萍, 黄锦炉, 王贵平, 仲颖

关键词：大口黑鲈, 蛙虹彩病毒, 卵黄抗体, 间接ELISA

大口黑鲈 (Micropterus salmoides) 蛙虹彩病毒 (Largemouth bass ranavirus, LMBV) 是我国大口黑鲈养殖中的常发病原，主要引起大口黑鲈病毒性溃疡病，制约其养殖业的健康发展。为探究卵黄抗体在防控LMBV中的潜在作用，利用LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡，制备了抗LMBV卵黄抗体；通过筛选捕获物浓度、包被条件和封闭条件，建立了抗LMBV卵黄抗体的间接酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测方法；使用构建的方法，评估了LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后卵黄抗体的效价消减规律。结果表明，1‰ (φ) β-丙内酯4 ℃作用72 h可完全灭活LMBV。间接ELISA反应中，每孔包被105 TCID50灭活病毒，37 ℃孵育2 h后，使用5% (φ) 牛血清白蛋白37 ℃封闭2 h，可有效降低阴性对照组卵黄抗体的背景值；此外，所建立的检测方法与杂交醴弹状病毒卵黄抗体、未免疫的蛋黄提取物和空白细胞不存在交叉反应，特异性较高。LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡约48 d可产生特异性卵黄抗体，免疫后58 d效价升高至峰值(1∶12 800)，峰值水平可持续至免疫后128 d。所构建的LMBV卵黄抗体检测方法，可实时监测LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后的特异性卵黄抗体效价水平的变化规律，确定LMBV卵黄抗体的高效免疫程序及高免蛋收集持续期，为LMBV卵黄抗体产品的开发、应用及LMBV的防治提供了新思路。

来源：2024年第2期

《南方水产科学》期刊编辑部

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