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国内刊号:44-1683/S
国际刊号:2095-0780
发布日期:
作者:杨志刚, 叶晓龙, 陈阿琴, 李腾, 王爱民, 耿明阳
关键词:中华绒螯蟹, 长链脂肪酸延长酶7, 基因克隆, 组织表达, 酵母异源表达
长链脂肪酸延长酶 (Elongation of long-chain fatty acids, ELOVL) 在长链多不饱和脂肪酸 (Long-chain polyunsaturated fatty acids, LC-PUFA) 的生物合成中起关键作用。为探究中华绒螯蟹 (Eriocheir sinensis) LC-PUFA的合成机制,采用cDNA末端快速扩增 (Rapid amplification of cDNA ends, RACE) 技术克隆获得中华绒螯蟹 ELOVL7基因。该基因cDNA全长序列为1 600 bp,包含1个1 200 bp的开放阅读框 (Open reading frame, ORF),编码399个氨基酸,其5' 非翻译区 (5'-UTR) 和 3'-UTR 长度分别为176和224 bp。ELOVL7具有典型的ELOVL结构,包括8个跨膜结构域、多个保守基序以及特征性的组氨酸盒 (HXXHH)。氨基酸序列相似性比对分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7与榄绿青蟹 (Scylla olivacea) 和三疣梭子蟹 (Portunus trituberculatus) ELOVL7的氨基酸序列相似性较高,分别为73.82%和73.76%。系统进化树分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7首先与榄绿青蟹和三疣梭子蟹ELOVL7聚为一支,进而与其他甲壳动物ELOVL7共同构成一个独立的甲壳类分支。基因组织表达分析显示,中华绒螯蟹ELOVL7基因在肠道组织中表达量最高,其次为鳃组织。为验证其功能,将中华绒螯蟹ELOVL7基因编码序列重组至pYES2载体,转化酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) INVSc1菌株,成功构建了其酿酒酵母异源表达系统。酵母异源表达分析表明,ELOVL7能催化脂肪酸底物C18:1n-9延长为C20:1n-9。
来源:2026年第1期
《南方水产科学》期刊编辑部
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